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核酸分析

核酸分析(基因组学)涉及DNA或RNA的分离和表征,用于基因分型、基因表达分析、表观遗传分析、微生物组研究等。亚博网站怎么样核酸分析的基础实验方法包括核酸提取与清除、DNA/RNA定量、PCR、分子克隆与测序。

核酸分析概论

纯化,DNA和RNA的定量和扩增是在许多实验室手术中使用的常用方法,跨各种应用。亚博网站怎么样从培养细胞,动物或植物组织,细菌,体液和其他样品类型中提取高质量的核酸是大多数基因组分析实验中的关键第一步。如果提取的DNA的质量差,则可以损害所有下游步骤。

在核酸提取和纯化期间,样品虽然常见的操作组:细胞裂解,清除,核酸结合,洗涤和洗脱的纯化的DNA或RNA。提取的核酸的纯度和产率是在诸如PCR和测序的下游应用中最佳性能的关键考虑因素。亚博网站怎么样

核酸纯化方法可以被设计用于分离广泛样本的DNA或RNA,也可以是特定于单个样本类型。大多数的DNA纯化试剂盒可以处理大量的样品类型和较小的协议变化,以确保完全裂解的起始物质。对于含有降解DNA或目标核酸浓度较低的更具挑战性的样本类型,可能需要专门的纯化试剂盒。具有挑战性的样本类型包括福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)组织样本、血浆或血清中含有循环无细胞DNA、法医样本或任何样本数量有限的来源。

一旦核酸被纯化,大多数下游检测都需要在开始之前对DNA或RNA进行定量。核酸定量方法包括荧光DNA或RNA结合染料的测量,260nm波长的吸光度的测量,以及qPCR。核酸纯度也提供了一个决定点,以继续进行下游的分析或不基于260/ 230nm或260/ 280nm的比率。

实时定量PCR或QPCR是用于检测和定量基因表达的标准核酸分析工具,以及用于检测特定的DNA序列,包括突变。标准端点PCR和RT-PCR用于检测和扩增特异性DNA序列以进行进一步操纵,包括通过测序分析。

克隆方法,包括酶切、亚克隆、PCR克隆和细菌细胞转化等,在分子生物学实验室中仍有广泛应用。这些经典的核酸遗传操作方法仍然是基因组分析的重要工具。

下面的资yabo88官网源提供了关于核酸分析方法的深入信息,并提供了每种应用的产品链接。