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克隆和DNA标记

修饰核酸的工具为许多分子生物学技术提供了基础,例如亚克隆。为常规克隆DNA片段,我们提供了多种限制性内切酶和T4 DNA连接酶。对于细菌转化,我们提供了感受态细胞的选择,包括我们独特的单步KRX菌株。

对于其他克隆应用,我们提供T4 DN亚博网站怎么样A激酶,小牛碱性磷酸酶和其他修饰酶。对于RNA转录,T7, SP6和T3 RNA聚合酶是可用的。

DNA/RNA标记的分类,包括台式梯和阶梯,可以确认一个成功的实验。

介绍克隆和DNA标记

亚克隆是分子生物学中一个基本的过程,用于将插入物从一个载体转移到另一个载体,以获得所需的功能和描述感兴趣的DNA序列。

一种完成DNA插入物的转移的方法使用限制酶来消化片段和靶向量,其通常是质粒。通过将消化样品的预期尺寸与DNA标记片段进行比较来实现成功消化的确认。这是通过在琼脂糖凝胶上运行样品来完成的,以便通过尺寸分离DNA片段。然后使用T4 DNA连接酶将所需片段“粘贴”进入消化的质粒。

下一步是转换。带质粒的细菌转化是重要的,因为细菌被用作储存和复制质粒的手段。大肠杆菌如果改变其细胞壁,细胞更可能掺入外部DNA,使得DNA可以更容易地通过。据说这种细胞是有能力的。成功转化的细胞的选择是通过抗生素选择对感兴趣的质粒进行。

有许多选择可以确认转移是否成功,包括PCR,用限制酶或测序消化。一旦确认,重组载体可用于各种应用,例如蛋白质表达或RNA转录。亚博网站怎么样