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免疫测定

Promega免疫测定试剂和基于抗体的检测系统包括新型Lumit™免疫测定,以及一种用于传统ELISA或Western印迹技术的一系列初级和二抗和检测试剂。

Lumit™免疫测定提供了一种简单且快速替代的常规免疫测定方法,包括夹心ELISA和Western印迹。基于生物发光的方法可以在短短30分钟内完成。我们为研究使用提供了几种类型的Lumit™免疫测定,包括检测蛋白质磷酸化,细胞因子,代谢物或新生儿Fc受体结合的特定试剂盒。Lumit™检测试剂以及用于构建您自己的Lumit™测定的标签套件也可供选择。

我们还提供Lumit™DX SARS-COV-2免疫测定,用于检测SARS-COV-2病毒的抗体存在的体外诊断测试。
目前,Lumit™DX SARS-COV-2免疫测定仅在美国提供。

什么是免疫测定?

免疫分析法是一种方便和广泛使用的检测方法,它基于抗体结合和检测特定抗原的能力。酶联免疫吸附测定法(ELISA)和免疫印迹技术是常用的免疫测定的典型例子。

ELISA以多种格式在Multwell板上进行。在夹心ELISA中,抗体与板表面结合并用于捕获来自样品如血浆或血清的样品的靶抗原。彻底洗涤后,加入第二抗体,其与抗原结合,产生抗体 - 抗原 - 抗体“夹心”。该第二抗体可以用能够检测的酶底物标记,或者可以用标记物种特异性二抗(例如,抗人IgG)检测。在其他ELISA格式中,靶抗原可以直接与板结合并用于检测样品中存在的抗体。然后使用二次标记的抗体检测这些结合的抗体。

在酶免疫测定中,与检测抗体连接的酶产生与原始样品中存在的靶抗原量成比例的颜色信号。根据免疫测定格式,可以使用分光光度法或荧光板读取器检测和测量颜色程度。

在蛋白质印迹中,将样品中存在的单个蛋白质在凝胶上分离并转移到硝酸纤维素膜上,然后用指向特定抗原的标记抗体询问。洗涤后,通过由标记的一抗产生的信号(颜色,荧光或化学发光)或二抗体产生的信号(颜色,荧光或化学发光)来观察结合的抗体。

ELISA和Western Blot技术提供特异性,灵敏度和相对易用性的优点。然而,它们是耗时的,涉及许多洗涤和孵化步骤。所涉及的步骤数量也可能导致显着的测定 - 测定变异性。

通过提供无洗涤的生物发光的方法,Lumit™免疫测定与蛋白质印迹和ELISA不同,用于以快速和敏感的形式检测各种靶分子。Lumit™免疫测定基于Nanoluc®二进制技术(Nanobit®)。在Lumit™免疫测定中,抗体或抗原分别与Nanobit®Luciferase的小和大亚基分别被称为SMBit和Lgbit的大小亚基。在存在靶分子的存在下,将两个亚基接近,允许SMBIT和LGBET形成活性酶并产生亮的发光信号,其使用微孔板读取器检测。