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蛋白质相互作用

我们提供许多蛋白质相互作用分析产品,包括下拉分析,基于bret和基于complementary reporter的系统。

GST下拉系统用于基于细胞提取和/或细胞自由表达的传统方法。HaloTag®哺乳动物下拉系统用于从哺乳动物细胞中分离和鉴定细胞内蛋白复合物。

NanoBRET™和NanoBiT®技术提供了直接分析活细胞中蛋白质相互作用的方法。NanoBRET™系统采用生物荧光共振能量转移(BRET),通过测量从生物荧光蛋白供体到荧光蛋白受体的能量转移来检测蛋白质相互作用。

NanoBiT®检测依赖于基于NanoLuc®荧光素酶的双亚基系统,可用于细胞内检测蛋白质:蛋白质相互作用。这些亚基与感兴趣的蛋白质融合,形成一种功能酶,在蛋白质相互作用时产生明亮的发光信号。

蛋白质相互作用的介绍

蛋白质:蛋白质相互作用(Protein interactions, PPIs)是细胞中几乎每一个过程都必不可少的,因此了解蛋白质相互作用对于理解细胞生物学的正常和疾病状态是至关重要的。有许多方法用于描述蛋白质相互作用,使用细胞提取物或活细胞来表达潜在的目标。

在下拉实验中,一个蛋白伴蛋白表达为融合蛋白(如诱饵蛋白)大肠杆菌然后用融合标记特异性的亲和配体进行固定化。然后,将固定的诱饵蛋白与猎物蛋白一起孵育。

免疫共沉淀是研究蛋白质的另一种选择:蛋白质相互作用。为了进行免疫共沉淀,将针对目标蛋白的抗体通过蛋白a或G偶联到Sepharose®beads上,然后用抗体偶联的beads免疫沉淀含有目标蛋白的复合物。

然而,这些研究蛋白质间相互作用的传统方法不能在细胞环境中直接提供数据。利用生物荧光共振能量转移(BRET)或互补分析,可以定量地测量活细胞中蛋白质之间的相互作用。