蛋白质纯化

蛋白质纯化是分析个体蛋白质和蛋白质复合物的基本步骤。大肠杆菌仍然是由于易于使用，快速细胞生长和培养成本低，因此仍然是许多研究人员生产重组蛋白的研究人员。在大肠杆菌中表达的蛋白质可以以相对高的量纯化，但这些蛋白质，尤其是真核蛋白质，可能没有表现出适当的蛋白质活性或折叠。培养的哺乳动物细胞提供了具有适当翻译后修饰的适当折叠和功能性哺乳动物蛋白质的替代选择。

为了简化纯化，亲和纯化标签可以融合到感兴趣的重组蛋白。常见的融合标签是多肽，小蛋白质或添加到重组蛋白的N-或C-末端的酶。纯化重组蛋白的第一步是制备细胞裂解物或上清液。对于分泌的蛋白质，需要最小的上清液制剂，然后选择纯化蛋白的选择性结合，洗涤和洗脱。纯化后，蛋白质可以用蛋白酶切割以除去亲和标记。